Avaliação preliminar da associação entre anfotericina e hesperina com oxidantes e células huvec / Preliminary assessment of the association between amphotericin and hesperetin with oxididants and huvec cells

A anfotericina B (AmB) é fármaco o “padrão ouro” para o tratamento de infecções fúngicas invasivas desde 1960, Entretanto, a anfotericina B apresenta elevada toxicidade, a qual manifesta-se mais frequentemente nos rins e no fígado, Sabe-se, desde 1985, que a auto-oxidação da AmB origina diferentes formas de espécies reativas oxidativas e estas, por serem tóxicas para a célula, seriam responsáveis, em parte, pela toxicidade, Diferentes estudos indicam que a hesperidina contribui por meio do decréscimo do estresse oxidativo, para a proteção renal e contra a injúria gerada pela isquemia, Tal fato e o envolvimento da AmB na geração de radicais livres tornam interessante a avaliação preliminar do efeito da hesperidina e AmB (isoladamente ou associadas) frente a espécies reativas do oxigênio e radicais livres, bem como o estudo das mesmas em modelos de citoxicidade, Frente ao ABTS•+, a AmB apresentou IC50 igual a 0,0124mg/mL, mas quando associada à hesperidina este valor caiu para 0,0003mg/mL, Frente ao HOCl, a Amb apresentou IC50 igual a 0,0056, mas quando associada à hesperidina este valor caiu para 0,0023mg/mL, No ensaio com DPPH• e radical ânion superóxido as amostras não foram efetivas, No ensaio com células endoteliais em cultivo (HUVEC), as associações reduziram a viabilidade celular, Estes resultados preliminares evidenciam a interação dos compostos com espécies reativas bem como indicam possibilidade de exacerbação do dano pela AmB na presença dos antioxidantes em um modelo in vitro...

Amphotericin B (AmB) is drug “gold standard” for the treatment of invasive fungal infections since 1960. However, amphotericin B has high toxicity, which manifests itself most often in the kidneys and in the liver. It is known, since 1985, that self-oxidation of AmB gives different forms of reactive oxidative species and these, being toxic to the cell, would be responsible, in part, by its toxicity. Different studies indicate that hesperidin contributes, through the reduction of oxidative stress, to protect against renal injury generated by ischemia. This fact and the involvement of AmB in the generation of free radicals make it interesting the preliminary evaluation of the effect of hesperidin and AmB (alone or associated) against reactive oxygen species and free radicals, as well as the study on models of cytotoxicity. Front ABTS•+, AmB presented IC50 equal to 0.0124 mg/mL, but when it was associated to hesperidin this value has decreased to 0.0003 mg/mL. Front HOCl, Amb presented IC50 equal to 0.0056, but when it was associated to hesperidin this value has decreased to 0.0023 mg/mL. In the trials with DPPH• and the superoxide anion radical samples were not effective. In the assay with endotelial cell culture (HUVEC cells), the association has decreased cell viability. These preliminary results demonstrate the interaction of the compounds with reactive species as well as indicate the possibility of damage exacerbation by AmB in the presence of antioxidants in an in vitro model...

Antitumor and immunomodulatory effects of the naphthoquinone 5-methoxy-3,4-dehydroxanthomegnin

Large number of quinones has been associated with antitumor, antibacterial, antimalarial and antifungal activities. In this work we describe the effect of the naphthoquinone, 5-methoxy-3,4-dehydroxanthomegnin, on murine tumor cells (LP07 and LM2) and its immunomodulatory effect on nitric oxide (NO) production on LPS-stimulated macrophages. The results have shown that 5-methoxy-3,4-dehydroxanthomegnin was a significant inhibitor of LPS-stimulated NO generation from macrophage (inhibition percentage ranged from 97.4 to 98.9 percent) and a strong cytotoxic agent against both tumor cells LP07 and LM2 (CI50 6.2±0.36 µM and 74.6±1.9 µM, respectively). These results indicate that the 5-methoxy-3,4-dehydroxanthomegnin may show promising activity in the treatment of murine breast and lung cancer by immunomodulatory and antiproliferative activities.

Diazepam, em dose única, inibe a migração celular, a estimulação macrofágica e a atividade de TNF-α na reação inflamatória aguda induzida por LPS em camundongos / Diazepam, in a single dose, inhibits cellular chemotaxis, macrophage stimulation, and TNF-α activity in LPS-induced acute inflammatory responses in mice

Os benzodiazepínicos estão entre as drogas mais freqüentemente prescritas em razão de suas propriedades ansiolíticas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do diazepam sobre a resposta inflamatória peritoneal aguda induzida por lipopolissacarídeo. Para tanto, camundongos Swiss foram tratados com diazepam (1 ou 10 mg/kg de peso), em dose única, por via subcutânea, uma hora antes do desafio intraperitoneal com lipopolissacarídeo bacteriano. Após 16 horas do desafio, os animais foram sacrificados, coletando-se os lavados peritoneais para determinação do número total de células e das subpopulações de mononucleares e polimorfonucleares, além da atividade de TNF-α e da porcentagem de macrófagos espraiados. Observou-se que o tratamento com diazepam, nas doses de 1 ou 10 mg/kg, reduziu significativamente a porcentagem de macrófagos estimulados por LPS e a liberação de TNF-α independente de estímulo. Houve também significativa redução da migração de leucócitos nos animais estimulados com LPS e tratados com 10 mg/kg de diazepam em relação aqueles não tratados. Concluímos que a administração do diazepam, em dose única, pode influenciar significativamente o influxo celular, a estimulação de macrófagos e a atividade de TNF-α na resposta inflamatória aguda induzida por LPS em camundongos, com possíveis implicações na eficiência da resposta anti-infecciosa.

Benzodiazepines are one of the most frequently prescribed drugs due to their anxiolytic properties. The aim of this study was to evaluate the effects of diazepam on lipopolysaccharide-induced peritoneal acute inflammatory responses. Swiss mice were treated with diazepam in a single dose of 1 or 10 mg/kg- subcutaneously 1 h before an intraperitoneal injection of lipopolysaccharide or sterile saline solution. The mice were killed 16 h after and the cells were washed from the peritoneal cavity to determine the total number of cells and the mononuclear and polimorfonuclear subpopulations, as well as the TNF-alpha activity and percentage of spread macrophages. Our results showed that the diazepam treatment (1 and 10 mg/kg) induced a significant reduction in the LPS-induced macrophage stimulation and TNF-α activity. Diazepam (10 mg/kg) also reduced the inflammatory cellular migration when compared to the control. It can be concluded that the diazepam treatment in a single dose is able to influence the inflammatory cellular influx, macrophage stimulation and TNF-α activity in the acute inflammatory response in mice, having possible implications on the anti-infectious response efficiency.

Immunological and microbiological activity of Davilla elliptica St. Hill. (Dilleniaceae) against Mycobacterium tuberculosis

Mycobacterium tuberculosis is responsible for over 8 million cases of tuberculosis (TB) annually. Natural products may play important roles in the chemotherapy of TB. The immunological activity of Davilla elliptica chloroform extract (DECE) was evaluated in vitro by the determination of hydrogen peroxide (H2O2), nitric oxide (NO), and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) release in peritoneal macrophages cultures. DECE was also tested for its antimycobacterial activity against M. tuberculosis using the microplate alamar blue assay. DECE (50, 150, 250 mug/ml) stimulated the production of H2O2 (from 1,79 ± 0,23 to 7,27 ± 2,54; 15,02 ± 2,86; 20,5 ± 2,1 nmols) (means ± SD), NO (from 2,64 ± 1,02 to 25,59 ± 2,29; 26,68 ± 2,41; 29,45 ± 5,87 mumols) (means ± SD) and TNF-alpha (from 2,44 ± 1,46 to 30,37 ± 8,13; 38,68 ± 1,59; 41,6 ± 0,90 units/ml) (means ± SD) in a dose-dependent manner and also showed a promising antimycobacterial activity with a minimum inhibitory concentration of 62,5 mug/ml. This plant may have therapeutic potential in the immunological and microbiological control of TB.

Effect of post-polymerization heat treatments on the cytotoxicity of two denture base acrylic resins

INTRODUCTION: Most denture base acrylic resins have polymethylmethacrylate in their composition. Several authors have discussed the polymerization process involved in converting monomer into polymer because adequate polymerization is a crucial factor in optimizing the physical properties and biocompatibility of denture base acrylic resins. To ensure the safety of these materials, in vitro cytotoxicity assays have been developed as preliminary screening tests to evaluate material biocompatibility. ³H-thymidine incorporation test, which measures the number of cells synthesizing DNA, is one of the biological assays suggested for cytotoxicity testing. AIM: The purpose of this study was to investigate, using ³H-thymidine incorporation test, the effect of microwave and water-bath post-polymerization heat treatments on the cytotoxicity of two denture base acrylic resins. MATERIALS AND METHODS: Nine disc-shaped specimens (10 x 1 mm) of each denture base resin (Lucitone 550 and QC 20) were prepared according to the manufacturers' recommendations and stored in distilled water at 37°C for 48 h. The specimens were assigned to 3 groups: 1) post-polymerization in a microwave oven for 3 min at 500 W; 2) post-polymerization in water-bath at 55° C for 60 min; and 3) without post-polymerization. For preparation of eluates, 3 discs were placed into a sterile glass vial with 9 mL of Eagle's medium and incubated at 37°C for 24 h. The cytotoxic effect of the eluates was evaluated by ³H-thymidine incorporation. RESULTS: The results showed that the components leached from the resins were cytotoxic to L929 cells, except for the specimens heat treated in water bath (p<0.05). Compared to the group with no heat treatment, water-bath decreased the cytotoxicity of the denture base acrylic resins. CONCLUSION: The in vitro cytotoxicity of the tested denture base materials was not influenced by microwave post-polymerization heat treatment.

INTRODUÇÃO: A maioria das resinas acrílicas utilizadas para confecção de bases de próteses é composta pelo polimetacilato de metila. Muitos autores têm discutido o processo de polimerização dessas resinas em relação à conversão do monômero em polímero devido a sua importância na melhora da biocompatibilidade e das propriedades físicas. Para assegurar a utilização desses materiais, testes preliminares de citotoxicidade in vitro têm sido desenvolvidos para avaliação da biocompatibilidade. Um dos ensaios biológicos sugeridos para a análise da citotoxicidade é o teste de incorporação de ³H-timidina, o qual mede o número de células por meio da síntese de DNA. OBJETIVO: O objetivo do presente estudo foi avaliar, por meio do teste de incorporação de ³H-timidina, a citotoxicidade de duas resinas acrílicas para base de próteses submetidas aos tratamentos em microondas e em banho de água após a polimerização. MATERIAL E MÉTODO: Nove corpos-de-prova em forma de discos (10 x 1 mm) foram confeccionados com as resinas acrílicas Lucitone 550 e QC 20 de acordo com as instruções dos fabricantes, e foram armazenados em água destilada a 37°C por 48 h. Os corpos-de-prova foram divididos em três grupos: 1) tratamento em forno de microondas por 3 min a 500 W; 2) tratamento em banho de água a 55°C por 60 min; e 3) sem tratamento térmico. Extratos foram preparados pela colocação de 3 discos em tubos de ensaio estéreis com 9 mL de meio de cultura Eagle e incubação a 37°C por 24 h. O efeito citotóxico dos extratos foi avaliado utilizando o teste de incorporação de ³H-timidina. RESULTADOS: Os resultados indicaram que os componentes liberados pelas resinas foram citotóxicos para as células L929 exceto para as amostras tratadas em banho de água (p<0.05). Em comparação com o grupo sem tratamento, o banho de água diminuiu a citotoxicidade das resinas acrílicas. CONCLUSÃO: O tratamento em microondas não influenciou a citotoxicidade das resinas acrílicas para bases de próteses.

Effect of post-polymerization heat treatments on the cytotoxicity of two denture base acrylic resins%Efeito de tratamentos térmicos após a polimerização sobre a citotoxicidade de duas resinas acrílicas para base de próteses

INTRODUÇÃO: A maioria das resinas acrílicas utilizadas para confecção de bases de próteses é composta pelo polimetacilato de metila. Muitos autores têm discutido o processo de polimerização dessas resinas em relação à conversão do monômero em polímero devido a sua importância na melhora da biocompatibilidade e das propriedades físicas. Para assegurar a utilização desses materiais, testes preliminares de citotoxicidade in vitro têm sido desenvolvidos para avaliação da biocompatibilidade. Um dos ensaios biológicos sugeridos para a análise da citotoxicidade é o teste de incorporação de ³H-timidina, o qual mede o número de células por meio da síntese de DNA. OBJETIVO: O objetivo do presente estudo foi avaliar, por meio do teste de incorporação de ³H-timidina, a citotoxicidade de duas resinas acrílicas para base de próteses submetidas aos tratamentos em microondas e em banho de água após a polimerização. MATERIAL E MÉTODO: Nove corpos-de-prova em forma de discos (10 x 1 mm) foram confeccionados com as resinas acrílicas Lucitone 550 e QC 20 de acordo com as instruções dos fabricantes, e foram armazenados em água destilada a 37ºC por 48 h. Os corpos-de-prova foram divididos em três grupos: 1) tratamento em forno de microondas por 3 min a 500 W; 2) tratamento em banho de água a 55ºC por 60 min; e 3) sem tratamento térmico. Extratos foram preparados pela colocação de 3 discos em tubos de ensaio estéreis com 9 mL de meio de cultura Eagle e incubação a 37ºC por 24 h. O efeito citotóxico dos extratos foi avaliado utilizando o teste de incorporação de ³H-timidina. RESULTADOS: Os resultados indicaram que os componentes liberados pelas resinas foram citotóxicos para as células L929 exceto para as amostras tratadas em banho de água (p<0.05). Em comparação com o grupo sem tratamento, o banho de água diminuiu a citotoxicidade das resinas acrílicas. CONCLUSÃO: O tratamento em microondas não influenciou a citotoxicidade das resinas acrílicas para bases de próteses

Surto de intoxicação alimentar estafilocócica no município de Birigui, São Paulo / Food-borne staphylococcal intoxication outbreak in Birigui municipality, São Paulo State

O presente trabalho descreve um surto de intoxicação alimentar ocorrido na cidade de Birigüi, São Paulo em 1998, que envolveu aproximadamente 1800 pessoas, sendo que dessas, cerca de 1200 eram criança sem idade escolar. Esses indivíduos alimentaram-se com a merenda escolar, servida nas escolas públicas do município, composta de arroz, feijão e farofa, esta contendo farinha de milho, farinha de mandioca, ervilha, milho em conserva, lingüiça tipo toscana e mortadela. Staphylococcus coagulase positiva e produtor de enterotoxina tipo A foi isolado da farofa, em população superior a 8,5 x 107 UFC/g. Esse achado indica que a farofa foi a fonte da contaminação bacteriana e responsável pela intoxicação alimentar.

Effect of the essential oil of Achillea millefolium L. in the production of hydrogen peroxide and tumor necrosis factor-"ALPHA" in murine macrophages

Macrophages release more than one hundred compounds into the extracellular environment. Among these, there are cytokines and intermediate oxigen compounds, such as TNF-"ALPHA" and 'H POT. 2''O POT. 2'. We evaluated the effect of the crude essential oil of Achillea millefolium L. (Asteraceae) by determining hydrogen peroxide ('H POT. 2''O POT. 2') and tumor necrosis factor-a (TNF-"ALPHA") release in cultures of peritoneal macrophages cells from Swiss mice. Commercial azulene was also tested for comparison with the essential oil. The macrophages viability in the presence of the oil was analyzed and dilutions of 1:100 and 1:200 showed the best results. A mild production of 'H POT. 2''O POT. 2' and a moderate liberation of TNF-"ALPHA" were observed...

Avaliação da citotoxicidade de cimentos endodônticos em relação aos reativos intermediários do oxigênio e do nitrogênio em culturas de macrófagos peritoneais de camundongos / Citotoxicity evaluation of endodontical cements regarding the oxygen and nitrogen intermediate reactives in peritoneais macrophages of mice culture

Analisou-se a citotoxicidade dos cimentos endodônticos Endofill, Sealapex e Polifilquanto à quantificação de óxido nítrico (NO) e peróxido de hidrogênio (H2O2) em culturas demacrófagos peritoneais de camundongos, cujas concentrações viáveis de sobrevivência celularforam antes obtidas por um método de análise colorimétrica, o M.T.T. Os resultados, a discussãoe a constatação evidenciaram que o cimento que apresentou menor índice de citotoxicidadee equivalência de quantificação foi o Sealapex em relação ao Endofill e Polifil, embora todostenham sido menos citotóxicos em relação ao Grupo Controle Zimosan-A para H2O2 e ao LPSpara o NO.

The citotoxicity of the following endodontical cements was analized: Endofill,Sealapex and Polifil concerning the Nitric Oxid (NO) quantification and the Hydrogen Peroxid(H2O2) in peritoniais macrophages medium of mice, whose viable concentrations of cell survicalwere obtained before through a colorimetric analysis method, using the M.T.T. The results, afterbeing discussed and checked, showed that the cement which were presented lower citotoxicitylevel was the Sealapex, and presented quantification equivalence concernning the Endofill andPolifil, although all of them were less citotoxic concerning the Zimosan-A Control Group forH2O2 and the LPS for NO.

Liberaçäo de óxido nítrico e TNF alfa em macrófagos peritoneais na presença de Melampodium divaricatum (Asteraceae) / Release of nitric oxide and tumor necrosis factor alfa by peritoneal macrophages in the presence of Melampodium divaricatum (Asteraceae)

As respostas imunes säo mediadas por uma variedade de células e por moléculas que estas células secretam. Macrófagos säo as primeiras células a participarem da resposta imunológica, e quando säo ativados liberam mais de cem compostos no meio extracelular, entre eles várias citocinas(TNF-alfa) e compostos reativos intermediários de nitrogênio (NO). Neste trabalho, determinou-se a liberaçäo de óxido nítrico e TNF-alfa em culturas de macrófagos peritoneais de camundongos em presença de extrato etanólico 70 por cento bruto obtido a partir de flores de Melampodium divaricatum (Asteraceae) nas concentraçöes de 20, 10 e 5mg/ml. O extrato etanólico 70 por cento bruto de Melampodium divaricatum (flores) induziu grande liberaçäo de NO e TNF-alfa na concentraçäo de 20 mg/ml quando comparado com LPS. Concluiu-se que esse extrato é um potente estimulador de macrófagos, podendo apresentar atividade imunomoduladora.

Avaliaçäo do potencial alergênico de um novo produto fermentado de soja / Evaluation of allergenic potential of a novel fermented soymilk product

O processo fermentativo induz uma reduçäo no pH do meio e, dependendo do cultivo bacteriano, observa-se uma açäo proteolítica com diminuiçäo da alergenicidade presente em algumas fraçöes protéicas da soja. No presente estudo, o objetivo foi avaliar o potencial alergênico induzido pela ingestäo oral de um novo produto fermentado de soja, buscando demonstrar a relaçäo existente entre o processo fermentativo e a alergenicidade. Trinta ratos Wistar, machos, adultos, foram separados em cinco grupos: 1. animais tratados com produto fermentado; 2. animais tratados com o produto näo fermentado (placebo); 3. animais sensibilizados com ovalbumina (controle positivo); 4. animais sem nenhum tratamento (somente soluçäo de Tyrode; controle negativo) e 5. animais estimulados pela açäo direta do produto fermentado, placebo e soluçäo de Tyrode. Os produtos fermentados e placebo foram obtidos de acordo com Rossi, et al. No exsudato peritoneal foi determinado o percentual de liberaçäo de histamina e concomitantemente, no mesmo animal, foi verificada a degranulaçäo de mastócitos. Os resultados mostraram que o produto fermentado apresentou um percentual de liberaçäo de histamina (12,6 ñ 2,1 por cento) e degranulaçäo de mastócitos (2,92 ñ 0,9 por cento) menores que o observado para o placebo (18,95 ñ 3,2 por cento e 5,5 ñ 2,3 por cento, respectivamente). Concluiu-se que o produto fermentado näo apresentou potencial alergênico e que o processo fermentativo reduziu favoravelmente a alergenicidade e que o processo fermentativo reduziu favoravelmente a alergenicidade das proteinas de soja.

O papel dos anticorpos antiespermatozóides na infertilidade / Antisperm antibodies and infertility

A pesquisa de anticorpos antiespermatozóides pode ser efetuada diretamente no plasma seminal ou indiretamente no soro sangüíneo de homens e mulheres. Visa determinar a presença de anticorpos dirigidos contra antígenos de superfície do espermatozóide, cuja expressäo está relacionada à infertilidade. Levando-se em conta que as análises seminais de rotina poderiam ser insuficientes para diagnosticar a infertilidade masculina, outros fatores, além dos parâmetros analisados num espermograma, devem ser considerados. As análises de funçäo espermática, capacitaçäo e presença de anticorpos podem estar relacionadas com a anormalidade dos parâmetros seminais. Além disso, a presença de microrganismos, inflamaçäo ou alta concentraçäo dos diversos tipos de leucócitos, bem como a aglutinaçäo de espermatozóides, podem alterar o comportamento do sêmen no trato reprodutivo feminino. O objetivo deste artigo é revisar o conhecimento atual sobre a importância dos anticorpos antiespermatozóides na gênese da infertilidade, suas correlaçöes com o parâmetros da análise seminal e as técnicas usadas para detectá-los.

Determinaçäo quantitativa de alfa-1-antitripsina e suas variaçöes fenotípicas no soro de portadores de infecçöes crônicas / Quantitative determination of alpha-1-antitrypsin and its phenotype variations in the sera of chronics diseases porters

A alfa-1-antitripsina (Ó1-AT) é uma proteína de fase aguda, sendo a mais importante de várias antiproteases, pois atua como protetora contra injúrias nos tecidos. Ela migra eletroforeticamente na regiäo das alfa-globulinas. Neste trabalho foram analisadas amostras de soros de pacientes portadores de infecçöes crônicas por parasitas e bactérias quanto à verificaçäo do fenótipo de Ó1-AT, caracterizado por focalizaçäo isoelétrica, e à sua determinaçäo quantitativa mediante a capacidade de inibiçäo da tripsina. Tanto os fenótipos quanto as dosagens de Ó1-AT inseriram-se dentro dos valores normais estabelecidos para estas metodologias. Estes resultados demonstraram que näo houve correlaçäo entre as patologias analisadas e o nível deste mediador do processo inflamatório. Provavelmnente, outros fatores do hospedeiro, tais como a imunomodulaçäo por citocinas, participaçäo de anticorpos e linfócitos T citotóxicos, estejam envolvidos na cronicidade destas infecçöes.

Imunidade celular em camundongos inoculados com fraçöes da parede celular de Paracoccidioides brasiliensis / Cellular immunity in mouse inoculated with fractions from the cell wall of Paracoccidioides brasiliensis

A parede celular do fungo Paracoccidioides brasiliensis (PbHC), em sua forma leveduriforme, foi segmentada em três fraçöes, 1, 2 e 3, que inoculadas em camundongos, foram avaliadas quanto à capacidade de induzir resposta imunecelular. O valor médio da espessura da pata foi semelhante para as três fraçöes, com manutençäo da resposta entre 24 e 48 horas no desafio com a fraçäo 1

Levantamento sorológico para sífilis em gestantes da cidade de Humaitá - AM / Serum, survey for syphilis in pregnant women in the city of Humaitá - AM

A sorologia da sífilis compreende dois tipos de testes: os chamados näo específicos ou näo treponêmicos, que utilizam cadiolipina como antígeno, e os testes específicos ou treponêmicos, que utilizam como antígeno o próprio Treponema pallidum. O objetivo desta pesquisa foi o de comparar os resultados do teste de VDRL nos exames de pré-natal realizados em gestantes em laboratório de Humaitá-AM, com os obtidos com as amostras através do mesmo teste e mais um teste näo específico (Fixaçäo do Complemento) e de um teste específico (FTA-ABS), realizados na Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara -UNESP. Foram encontradas discrepâncias entre os resultados obtidos através dos testes realizados em Humaitá e na Faculdade de Ciências Farmacêuticas, que podem ser atribuídas a uma execuçäo mais criteriosa do teste de VDRL em nossa Unidade, confirmada pela maior especificidade e/ou sensibilidade das demais provas usadas